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基础分子服务

服务名称:荧光定量PCR检测

服务简介:实时荧光定量PCRQuantitative Real-time PCRQPCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光染料测定每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法,广泛应用于临床疾病诊断、动物疾病检测、食品安全以及科学研究领域中。荧光定量PCR技术通过在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。HRM主要是根据DNA序列长度,GC含量及碱基互补性差异,应用高分辨率的熔解曲线达到对样品中单个碱基差异进行区分的目的。

佰昊生物使用QIAGEN公司RGQ实时荧光定量PCR仪,进行QPCR及高分辨熔解曲线(High-resolution melt, HRM)分析,为您提供一流的实时荧光定量PCR服务,结果真实、可靠。佰昊生物荧光定量PCR可检测项目包括相对定量、绝对定量,mRNAmiRNAlncRNA、环状RNA等。

服务流程:


服务周期:
5-10个工作日

结果展示:


图A QPCR方法检测衰老标记。


端粒的长度使用Rotor-Gene® Q real time PCR仪,QIAGEN Rotor-Gene SYBR Green Kit 对人外周细胞的gDNA进行QPCR检测。在20ul体系中gDNA浓度为从0.1ng~6.25ng/PCR. PCR反应条件为: 95oC 5s; 98oC 7s, 60oC 10s (25cycles)。



B 健康个体中年龄与端粒长度的线性关系


图B使用Rotor-Gene Q仪器中的计算方法,测定了299个年龄在0-99之间的健康个体的端粒长度。结果显示年龄与端粒长度呈负相关关系;年龄越大,端粒长度越短。

服务应用:
1、基因的突变扫描:检测杂合子SNP、区段/碱基缺失、前后重复、杂合子缺失;
2、HLA基因组配型:器官移植的HLA配型、同胞之间HLA基因型确定;
3、物种鉴定、品种鉴定:微生物品种、物种快速鉴定;动植物品种鉴定;
4、甲基化研究:甲基化位点的筛查;甲基化程度分析;
5、法医学鉴定、亲子鉴定:检测单核苷酸多态性SNP鉴定,插入/缺失多态性DIP鉴定等。
客户提供材料:检测指标、待检测样品及实验分组信息等
送样要求:
1、Total RNA样品:浓度≥100ng/μl,总体积≥30μl,OD260/280为1.9~2.1,一般总量2~10μg,电泳有两条清晰无离散的条带,且28S(原核生物为23S)亮度为18S(原核生物为16S)的一倍。运输时使用足量的干冰。
2、组织及血液样品:对于需要进行RNA抽提的组织样品,请使用新鲜取样的实验材料,当场分成小块后立即用液氮速冻,并保存于-80℃冰箱,运输时使用足量的干冰。对于需要进行RNA抽提的细胞样品,可使用冰PBS洗两次后离心的细胞沉淀或细胞冻存液,干冰运输;或者使用37℃保存的细胞培养液,37℃运输。(动物组织样品总量不要超过1.5 ml EP管体积的一半)

交付材料:电子版实验报告及EXCEL格式实验数据
服务说明:
1、默认每个样品3个平行;
2、常规物种常规内参免费(人、大鼠、小鼠)。